У предметній галузі: біохімія, генетика та молекулярна біологія. Ця методика передбачає позначення сегмента ДНК флуоресцентною міткою та можливість його відпалу до відповідного розташування в хромосомі.
Флуоресцентне мічення нуклеїнових кислот – це зазвичай здійснюється шляхом ферментативних реакцій. Органічні флуорофори хімічно вводяться в праймери або нуклеозидтрифосфати, а потім вбудовуються або за допомогою ПЛР-ампліфікації, або за допомогою ДНК- чи РНК-полімераз або термінальної полінуклеотидтрансферази (2–4).
У молекулярній біології та біотехнології флуоресцентна мітка, також відома як флуоресцентна мітка або флуоресцентний зонд, молекула, яка приєднується хімічно, щоб допомогти у виявленні біомолекули, такої як білок, антитіло або амінокислота.
Хоча останній клас молекул широко корисний, флуоресцентні нуклеооснови пропонують деякі важливі переваги, зокрема: (1) розміщення хромофора безпосередньо в спіралі ДНК/РНК, таким чином слугуючи чутливим і просторово фіксованим зондом структури спіралі та взаємодій; і (2) принаймні в деяких випадках, …
Плями ДНК є флуоресцентні барвники, що зв'язують нуклеїнові кислоти і мають широкий спектр застосувань, у тому числі в проточній цитометрії, дослідженнях клітинного циклу, контрастному фарбуванні хромосом і ядер, як індикаторі апоптозу та для кількісного визначення ДНК.
Флуоресценція ДНК, опроміненої ультрафіолетовим випромінюванням, найбільш виражена, коли тимінові нуклеооснови розташовані поруч одна з одною. Природні та синтетичні ДНК стають флуоресцентними при УФ-опроміненні при кімнатній температурі, коли присутні тимінові та аденінові нуклеооснови.
Методи флуоресцентного маркування зазвичай є такими на основі реактивних похідних флуорофорів, які вибірково зв'язуються з функціональними групами, що містяться в цільових біомолекулах і широко використовуються в біотехнології через їхні неруйнівні властивості та високу чутливість флуоресцентних методів (Sahoo, 2012).