Для приготування 1 л фарбувального розчину розчиніть 1 г кумасі R250 у 300 мл метанолу. Потім додають 650 мл води MQ і 50 мл оцтової кислоти.
Забарвлення: розчиніть 0,4 г кумасі блакитного R350 у 200 мл 40% (об’єм/об’єм) метанолу у воді, перемішуючи за потреби. Відфільтруйте розчин, щоб видалити будь-який нерозчинний матеріал. Додайте 200 мл 20% (об’єм/об’єм) оцтової кислоти у воді. Кінцева концентрація становить 0,1% (мас./об.) кумасі синього R350, 20% (об./об.) метанолу та 10% (об./об.) оцтової кислоти.
5.1 Фарбування барвником Coomassie Brilliant Blue R-250 Приготуйте розчин для фарбування: 0,1% Coomassie Brilliant Blue R-250 (w/v) у 40% метанолі (v/v), 10% оцтової кислоти (v/v). Відфільтруйте фарбувальний розчин після того, як барвник розчиниться. Розчин для фарбування багаторазовий. Зберігайте при кімнатній температурі.
Розчин для фарбування Приготуйте 5% розчин фенолу, розчинивши 5,0 г фенолу в 100 мл дистильованої води.. Приготуйте карболфуксин Ціля-Нільсена, змішавши 10 мл спиртового основного фуксину та 90 мл 5% фенолу та залишивши суміш на 24 години. Перед застосуванням розчин фільтрують.
Розчин для фарбування ○ 0,25 г кумасі блакитного в 30 мл метанолу ○ Додайте 10 мл крижаної оцтової кислоти ○ 60 мл дистильованої води ○ Фільтруйте ватманом. ○ Зберігайте при кімнатній температурі в захищеному від світла місці. Використання: налийте розчин у ємність і залиште на ніч, щоб забарвити SDS-гель.
Приготуйте фарбувальний розчин, що містить 0,1% кумасі R-250 в 40% етанолі, 10% оцтової кислоти. Після електрофорезу інкубуйте 1 або 2 гелі в контейнері для фарбування, що містить 100 мл розчину для фарбування Coomassie Blue R-250. Застереження: Будьте обережні, виконуючи наведені нижче дії за допомогою мікрохвильової печі.
Рецепт розчину кумасі блакитного кольору
- Розчиніть 2 г кумасі блакитного (Serva Blau) у 250 мл води.
- Повільно додайте 75 мл крижаної оцтової кислоти.
- Додайте 500 мл етанолу.
- q.s. до 1000 мл з водою.