Як правило, для вимірювання OD600 використовується настільний спектрофотометр. Зразок (бактеріальну культуру) поміщають у кювету та вставляють у спектрофотометр. Джерело світла з довжиною хвилі 600 нм спрямовується на зразок – клітини в зразку розсіюють світло, а пропущене світло виявляється, забезпечуючи зчитування. 11 травня 2023 р.

Використовуючи спектрофотометр, кількість світла, що проходить, зменшується зі збільшенням популяції клітин. Світло, що проходить, перетворюється на електричну енергію, і це відображається на гальванометрі. Показник, який називається абсорбцією або оптичною щільністю, опосередковано відображає кількість бактерій.

Просвічуючи світлом певної довжини хвилі — найчастіше 600 нм або помаранчевим — через суспензію бактерій у живильному бульйоні та вимірюваючи поглинання цього світла через регулярні проміжки часу, можна визначити концентрацію (і, отже, кількість) бактерій, а також їх швидкість. і стадію росту можна виміряти.

Вимірювання концентрації Вимірювання концентрації хімічної речовини в розчині за допомогою спектрофотометра є найпоширенішим застосуванням. Переставляючи рівняння Беера-Ламберта (A = εcl) на c= A/εl, ми можемо обчислити концентрацію безпосередньо за показником абсорбції.

Два найбільш широко використовувані методи визначення кількості бактерій є стандартний або життєздатний метод підрахунку пластин і спектрофотометричний (турбідиметричний) аналіз. Хоча ці два методи дещо схожі за результатами, які вони дають, є чіткі відмінності.

Спектрофотометри використовуються більше 6 десятиліть як засіб вимірювання щільності популяції мікробних культур [2–4]. Щільність популяції оцінюється за каламутністю культури і зазвичай виражається як OD (оптична щільність), як правило, на довжині хвилі 600 нм.

Зверніть увагу, що кювета розрахована на те, щоб світлові хвилі проходили крізь неї певним чином. Переконайтеся, що ви зорієнтували його в спектрофотометрі. Щоб промінь світла проходив через нього правильно. шлях.